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食用菌菌種怎樣保存和儲藏
來源:上秋制冷 作者: 發布時間:2021-07-08 65次瀏覽
 一、任務目的
 
·熟悉利用低溫、干燥、缺氧等進行菌種保藏的原理。
 
·掌握菌種常用保藏技術。
 
二、任務原理
 
保藏菌種一般以試管的形式進行保存。菌種保藏的基本原理是盡可能地降低菌絲的生理代謝活動,使生命活動處于休眠狀態,從而達到菌種保藏的目的。通常采用干燥、低溫、冷凍及缺氧、真空等手段進行菌種保藏。
 
三、材料與儀器
 
母種試管、PDA試管斜面,麥粒、液狀石蠟(裝入三角瓶中,經高壓蒸汽滅菌后,40℃干燥箱烘干水分后備用)、濾紙條(裝入培養皿中經1.05kg/cm2高壓蒸汽滅菌后備用)、滅菌插菇鐵絲架、無菌帶棉塞空試管、超凈化工作臺、接種用具、無菌鑷子、固體石蠟、坩堝、酒精燈、試管架、塑料薄膜、牛皮紙、捆扎繩、標簽、普通冰箱等。
 
四、任務實施
 
1.斜面低溫保藏法
 
將保藏的母種接入PDA斜面培養基中,待菌絲長至斜面的2/3時,選擇菌絲生長粗壯整齊的母種試管,將試管口的棉塞用剪刀剪平。利用酒精燈在坩堝里溶化固體石蠟,用于密封試管口,在外包扎一層塑料薄膜,最后將試管斜面朝下放入4℃冰箱里保存。有效保藏期一般為3~6個月,最好在2~3個月時轉管。如用無菌膠塞封口的菌種,在冰箱中可保藏3年之久,仍具有很強的生活力。保藏的菌種在使用時應提前12~24h從冰箱中取出,經過適溫后恢復活力方能轉管。
 
2.麥粒培養基保藏法
 
選擇顆粒飽滿、新鮮、無病蟲害的小麥粒,用清水浸泡10h左右,濾干后分裝入試管,容量為試管長度的1/3,塞好棉塞,在1.05kg/cm2壓力下滅菌1h,28℃培養24h后,再在1.05kg/cm2壓力下滅菌1h。在無菌操作下,將要保藏的菌種接入滅菌好的麥粒培養基內。在25℃下培養,菌絲長滿培養基后,在無菌操作下換上無菌膠塞并蠟封,放入4℃左右冰箱內保藏。使用時,在無菌操作下,將每支斜面培養基中央接入少量麥粒,培養至菌絲長滿斜面即可。采用麥粒培養基作為保藏菌種的培養基,可保藏菌種1年以上。
 
3.液狀石蠟保藏法
 
將需要保存的菌種接到培養基上,最好用綜合馬鈴薯瓊脂培養基,在適溫下培養至菌絲長滿斜面。然后把液狀石蠟裝于三角瓶中,裝至瓶體1/3處,塞上棉塞,并包紙,另將10mL試管若干支也包裝好,在1.05kg/cm2壓力下滅菌1h,再放入100℃烘箱內干燥1h,以蒸發其中水分,至石蠟油完全透明為止。將處理好的石蠟油移接到空白斜面上,在28~30℃下培養2~3d,證明無雜菌生長方可使用。然后用無菌操作的方法把液狀石蠟注入待保藏的斜面試管中。注入量以高出培養基斜面1~1.5cm,塞上橡皮塞,用固體石蠟封口,直立于低溫干燥處保藏。保藏時間在一年以上,在低溫下,保藏時間還可延長。
 
五、實驗報告
 
(1)結果分析 分析菌種保藏存活率低的原因。
 
(2)問題討論 觀察結果并對出現的問題進行分析、討論。
 
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